环状RNA的过去，现在与将来

“所有的真理都经历三个阶段。第一，被嘲笑。第二，被激烈坚决。第三，被认可且是正因如此的。”——Arthur Schopenhauer马蹄形RNA是近些年的科学研究热点。据悉，AmericanBrandeis大学生物锥体系的Sebastian Kadener等人在EMBO上近期了马蹄形RNA的科学研究进展。BioArt对其顺利完成了重写，以飨读者。马蹄形RNA（circular RNA， circRNA）是由反之亦然补拍（back-splicing）现实生活造成了的共价闭合为马蹄形RNA。其兼具真核之中珍贵，生命锥体上开明，民在在组织专一性暗指，相对于有利于，可在神经民在在组织之中随衰总和等特点。并且，circRNA可以通过竞争者补拍作法与其对应的给实有RNA之中在在锥体顺利完成卤代烃可调。最近的刊文声称它还兼具官能团可调一般而言：某些circRNAs能与microRNAs震荡，一些可被之中文翻译，可调免疫系统反应和行为。本文近期了类动物circRNAs现有可知的学问，概述了circRNAs潜在一般而言的最新见解，起源的概念，以及本科技领域无论如何的将会一段距离。现在到现在注意到：1976年，Sanger首次在类病毒之中注意到了双螺旋共价闭合为马蹄形的RNA底物。第二份科学研究是1979年Hsu描述了很难自由人内侧的马蹄形RNA的依赖于。；也：有数的科学研究属实circRNAs来起源于内源RNA。首篇此类刊文是在1991年，误打误撞注意到结肠癌DNA缺失（DCC）愈演愈烈了非经典补拍作法 (“scrambled exons”) 专一性成因。随后，又注意到了生命体EST-1和SryDNA也有类似成因，证明这些兼具scrambled exons的无polyA RNA都是circRNA。并且注意到circSry兼具民在在组织专一性，且依赖于于3个完全相同的果蝇品种。造成了：在接下来的几年里面，较少量科学研究提造出异议了这些底物造成了的无论如何前提。这最主要了推论：反之亦然反复对Sry的醛是必需的；以及注意到circRNA可以在锥体外通过核提取物造成了。归类：随后的90年代后半期到20世纪中后期，科学研究注意到多种DNA可以造成了circRNAs，并且对推实有的circRNAs顺利完成了简单归类为scrambled-exon，线粒锥体醛之中在在锥体（exon-shuffling products），或者只是“非给实有mRNA”。此时期的科学研究虽然证明了这些马蹄形RNA底物的依赖于，但是对其潜在的冲击未有充分认识。爆发式科学研究：大概在2010年开始，RNA-seq关配锥体技术的拓展以及专门的量化油管开发，了circRNA 科学研究。在2010年中期，注意到多蛋白类动物之中兼具成百上千种circRNA，其之中大部分是低暗指的，但是有些是高金属量的。而且，在许多意味着，如circSry可以是该细胞内DNA（host gene）的主要之中在在锥体。2013年的两篇文章除了证明多种哺乳类动物之中依赖于成百上千circRNA以外（野也有春天，小杂志开启大热门科技领域），还属实CDR1as (ciRS-7) 和circSry，都能相结合为并可调特实有microRNA的活性！另外，许多指导工作都声称在生命体，鼠，蟋蟀之中circRNAs是民在在组织和成年期真实世界专一性暗指的。这些科学研究还描述了断实有与起因circRNAs的新颖分析方法。比如，分析分析方法RNase R预处理后的无polyA circRNAs可溶性月刊。这个分析方法都能可溶性circRNAs，也能区分真正的circRNAs和含scrambled exons的mRNAs。由于circRNAs junction的独有适应性，对其断实有和表征须要类似于设计的生物锥体信息学量化油管。现而今，不太无论如何依赖于大量的油管可以注释和量化circRNAs。值得注意的是新circRNAs监测分析方法和油管也能监测潜在的circRNAs在表面上高性能补拍的依赖于。民在在组织专一性与成年期阶段专一性：近些年，circRNAs的民在在组织专一性和深受成年期阶段可调而造成了的适应性被属实。四份分立指导工作声称多种circRNAs在脑部之中高金属量依赖于，并且随着神经分化和成年期迅速缩减。而且，circRNAs造成了被轴突活动可调，而且在微管锥体、树突、微管神经节之中大量依赖于。circRNAs普遍依赖于于神经民在在组织的成因在自愈类动物之中来得相比，吸取了大量的circRNAs，暗指了circRNAs准确度与蛋白分裂领军呈负相关性。一般而言与可调：实际上，circRNAs可以卤代烃和官能团发挥作用一般而言。2014年，Ashwal-Fluss注意到circRNAs是与常规补拍共专一性并且相互竞争者的。因此，circRNAs的生物锥体愈演愈烈随之而来了同一细胞内DNAmRNAs催化的减小。几个课题组断实有了线粒锥体补拍和醛所须要之物，属实了醛信号整合为在可醛线粒锥体桥头堡的生殖蛋白之内。Ashwal-Fluss也暗指了可调蟋蟀之中circMbl之中在在锥体的负反馈可调环路的依赖于，在褐之中断实有了第一个参与线粒锥体醛的复合为物（补拍碱基muscleblind， MBL）以及其两栖类共同点物muscleblind-like复合为物1（MBNL1）。随后的指导工作断实有了其他的RNA相结合为复合为物RBPs都能在完全相同系统和生物锥体之中依赖性线粒锥体醛，最主要RNA腺苷脱氨酶（ADAR），quaking（QKI），FUS，核碱基NF90/NF110，DHX9，腺锥体补拍可调复合为物ESRP1，丝氨酸/精氨酸所含复合为物。仍要，现有的指导工作不太无论如何暗示了circRNAs与完全相同系统在在的相关性。在褐脑部，果蝇和生命体蛋白之中依赖于都能造成了复合为物疏松的一组circRNAs；有的circRNAs与免疫系统积极响应相关；几份报告属实了circRNAs在果蝇和褐脑部以及骨髓之中兼具一般而言；大量科学研究展示了circRNAs和肝癌有关。这些拓展说明了研究成果对circRNAs的看法愈演愈烈了清晰的忽略，显造出这个振奋人心和加速拓展的科技领域进入了时代转捩点。1. circRNAs的造成了1.1反之亦然补拍前提线粒锥体；也的circRNAs是通过反之亦然补拍的特实有适应性补拍作法造成了的，即一个5’补拍供锥体攻击干流3’补拍碱基，过渡到3’-5’甘氨酸配锥体造成了一个马蹄形的RNA底物。尽管绝大大部分真天冬氨酸之中circRNAs都是由补拍锥体造成了，完全相同生物锥体之中的实际前提是完全相同。与类动物完全相同，豆科植物之中的circRNAs从兼具非常稍短的表征核苷酸甚至显然很难表征性的窄生殖蛋白的桥头堡区域而来。耐人寻味的是，古生菇之中circRNAs的造成了分立于补拍锥体，随之而来了各种各样的circRNAs，其之中仅仅16%来起源于序列DNA以及来得较少来自于线粒锥体。多蛋白生物锥体之中，早先刊文声称补拍碱基桥头堡于可醛线粒锥体是最经典的，而且反之亦然补拍是通过补拍锥体执行。耐人寻味的是，circRNAs普遍还最主要基本线粒锥体而且多来起源于序列线粒锥体，特别是整合为于复合为物序列DNA的5’UTR。这随之而来了反之亦然补拍联接由序列核苷酸到序列核苷酸（CDS-CDS）和5’UTR-CDS组成，来得趋还最主要DNA的第二个线粒锥体。这无论如何与它们的生物锥体愈演愈烈相关，须要相比于超过而言来得窄和来得取而代之补拍的生殖蛋白；不一实有第一个生殖蛋白满足上述两个原则。在许多意味着，circRNAs的造成了起源于适合为于的高性能补拍决实有。一些DNA造成了多种高性能补拍反式以及circRNAs，这暗指了反之亦然补拍和高性能补拍无论如何是一般而言相关的。1.2 核苷酸和复合为物动力线粒锥体醛线粒锥体；也的circRNAs的造成了排斥依赖以下数一种前提：兼具窄反之亦然反复或相结合为RBPs的生殖蛋白。两种前提都将circRNAs桥头堡的生殖蛋白们紧紧挨起来。多种生物锥体之中，可醛线粒锥体被窄生殖蛋白侧腹重重包围，这些生殖蛋白许多都所含大量的反之亦然表征配对。因此，生殖蛋白之中反之亦然表征反复的依赖于可以被用来得造出线粒锥体是否有无论如何愈演愈烈醛。完全相同品种之中，反之亦然表征元件兼具完全相同的基序（motif）与金属量，对这些基序顺利完成核苷酸对照命令了无论如何的生命锥体父长子关系。此外，在生殖蛋白之在在和之内的反之亦然反复元件的地理分布对circRNAs的生产量与适应性兼具重大冲击。尽管桥头堡生殖蛋白之中窄反之亦然反复作造出贡献了线粒锥体醛，这些生殖蛋白之中依赖于的其他反之亦然反复无论如何会抑制作用生殖蛋白在在的震荡（inter-intronic interactions），取而代之的是生殖蛋白内的震荡（intra-intronic interactions）。后者来得趋抑制作用线粒锥体醛，无论如何是通过生殖蛋白在在二级形态竞争者。RBPs介导了另一种前提。并非所有桥头堡所含窄生殖蛋白的线粒锥体都能被醛。许多可醛线粒锥体桥头堡生殖蛋白之中另有有反之亦然反复，这排斥暗指了依赖于线粒锥体醛的其他前提。MBL与几个相对于开明的生殖蛋白碱基相结合为，作造出贡献了其自身DNA第二线粒锥体的醛。mbl第二线粒锥体桥头堡的生殖蛋白还最主要了稍短反之亦然反复，无论如何都能有利于生殖蛋白在在震荡，但是在缺乏MBL相结合为时无论如何太弱而不足以作造出贡献线粒锥体醛。这排斥地暗指了MBL作造出贡献醛是通过相结合为到桥头堡生殖蛋白从而作造出贡献生殖蛋白-生殖蛋白在在震荡。MBL底物无论如何愈演愈烈二聚化，把两个线粒锥体内侧来到一起，从而补拍过渡到circRNA。其他RBPs，如QKI，FUS，ESRP1也能可调线粒锥体醛。仍要，褐之中laccase-2DNA；也的circRNAs的生物锥体愈演愈烈深受到完全相同RBPs的共同可调，如异疏松核糖核复合为物hnRNPs以及SR复合为物，暗指了也就是说线粒锥体的醛效领军无论如何是多种信号的整合为结果。这种通过生殖蛋白-生殖蛋白震荡作造出贡献醛愈演愈烈数部份起源于给实有补拍的空在在内位阻（steric inhibition）。那么，作造出贡献或打乱RNA形态的因素，无论如何忽略circRNAs糖类。或许，最近指导工作声称通过dsRNA特异腺苷脱氨酶ADAR编辑RNA，可调了circRNAs的催化。而且，RNA解旋酶DHX9通过打乱基于ALU反之亦然反复的二级形态限制了circRNAs造成了。DHX9与干扰素诱导的ADAR反式（p150）必要震荡，过渡到的复合为锥体打乱了RNA二级形态，最主要许多都能作造出贡献线粒锥体醛的形态。下调DHX9翻倍了circRNAs。这无论如何是一个校正前提来减小circRNAs的广泛造成了，暗指了某些circRNAs不只是“原料有缺陷”或补拍噪声。部份涉及到dsRNA形态显现造出来的生理举例也无论如何忽略circRNAs催化。比如，免疫系统积极响应碱基NF90和NF110会可调circRNAs造成了。耐人寻味的是，这些复合为物与专一性现实生活过渡到的dsRNA形态愈演愈烈震荡。NF90/NF110看上去能有利于这种实有时双股RNA底物，作造出贡献了一组circRNAs的反之亦然补拍。耐人寻味的是，NF90相结合为碱基是选择性珍贵于桥头堡生殖蛋白的ALU motif。因此，这些线粒锥体的醛也可深受到ADAR和/或DHX9依赖性。1.3 circRNAs催化的依赖性circRNAs由RNAPCRII专一性并且由补拍锥体造成了。不可或缺的是，许多过渡到circRNAs的线粒锥体很难高性能补拍，因此，一些高金属量的circRNAs都能卤代烃可调mRNA的造成了。除此之外，circRNAs的造成了不止与补拍有关，还与取而代之的聚合为和polyA化相关。如果circRNAs的造成了是与经典补拍竞争者，那么忽略补拍效领军无论如何会可调circRNAs的造成了。通过可调卤代烃补拍碱基或忽略RNA PCRII专一性凝聚态（被认为可以依赖性高性能补拍）可以忽略补拍效领军。结果或许如此，下调普遍补拍可调长子如SR复合为物SF2或核心补拍锥体元件（小核糖核复合为物颗粒U1亚单位70K和C）snRNP-U1-70K，snRNP-U1-C，preRNA原料8（Prp8，Slu7），蛋白分裂周期素40（CDC40），将之中在在锥体从给实有变成了circRNAs。同样，抑制作用专一性重新启动缩减了circRNAs催化。1.4 circRNAs的水解circRNAs很难自由人内侧因此并很难共通诸多经典RNA水解途径。锥体外科学研究声称，大大部分circRNAs都兼具来得窄的半衰期（18.8-23.7h），而其给实有对应物是（4.0-7.4h）。circRNAs在锥体内无论如何兼具来得窄的半衰期，尤其是不分裂蛋白，比如，脑部之中随年窄缩减的circRNAs吸取无论如何是起源于这些底物的有利于性与不分裂适应性。与之显然，在高速裂解的蛋白之中circRNAs看上去会吸取，无论如何起源于分裂慢于造成了随之而来的稀释作用。实际上，circRNAs水解无论如何起早于一个核酸内切酶，随后合为组外切和内切。小RNA介导的circRNAs水解是近期断实有比较好的circRNAs水解途径。然而，唯一的例长子是CDR1as被miR-671水解。CDR1as的生产量被miR-671通过AGO2介导的水解必要可调。耐人寻味的是，CDR1as准确度很无论如何是通过补拍被miR-7可调的，并且依赖于miR-671。最近的一份科学研究暗指RNA修饰（m6A）作造出贡献了潜在可水解circRNAs的核酸内切酶的征募。另一项科学研究注意到HeLab蛋白可不poly（I：C）处理或EMCV病毒感染即愈演愈烈整锥体而言circRNAs的水解。两种处理都随之而来了内切原核生物锥体酶Rnase L的转录以及circRNAs的水解。除了水解，circRNAs无论如何被蛋白外增生。几项科学研究监测了外泌锥体之中的circRNAs。然而，由此可知不可信是否circRNAs的增生对降低其胞内准确度有贡献。或者，circRNAs增生无论如何过渡到了一个国际交流前提。总的来说，考虑到迅速缩减的证据看造出circRNAs是一般而言底物，它的水解、胞外交通运输都会是将会科学研究的不可或缺理由。2. circRNAs的构造和形式2.1 circRNAs的生命锥体开明性circRNAs依赖于于绝大大部分生物锥体之中。它们是如何生命锥体的？circRNAs开明性有多个层面。第一个是直系共同点orthologous或支系共同点paralogous碱基都可造成了circRNAs。某些circRNAs造成了于完全相同品种之中同样的或不尽相同的线粒锥体。这种意味着，开明性无论如何扩展到circRNAs桥头堡的部份补拍碱基。一份通过mapping醛补拍碱基的科学研究分析分析方法了从生命体和果蝇脑部；也的circRNAs，结果声称，大概1/3监测的circRNAs构建两个补拍碱基，1/3构建一个补拍碱基，声称了在哺乳类动物脑部之中非常相对于的开明性。仍要一个准确度是circRNAs内一般而言元件的开明性。这无论如何最主要了RBPs相结合为碱基，miRNA，或circRNAs内一般而言性二级形态所所需元件。比如，Rybak注意到了稍短反之亦然反复核苷酸（某些无论如何是RBP相结合为碱基）在circRNAs线粒锥体之中可溶性，指造出了醛线粒锥体之中来得高准确度的开明性。2.2民在在组织或成年期阶段以及亚蛋白整合为专一性暗指造成了circRNAs的DNA所含脑部相关DNA。因此，神经民在在组织之中所含circRNAs也就不奇怪了。circRNAs珍贵于CNS之中是所有科学研究品种之中的普遍构造。CNS之中circRNAs的显着珍贵无论如何起源于1个或多个因素。首先，脑部，来得特别的，在整个双腿之中轴突表现造出最高准确度的高性能补拍。而circRNAs的糖类可以被界实有为一种类似于适应性的高性能补拍。第二，circRNAs半衰期窄，并且轴突一般而言会分裂，circRNAs实际上可以在脑部成年期和自愈现实生活之中不断吸取甚至取而代之领军造成了。circRNAs在果蝇蟋蟀之中随着自愈在脑部之中大量总和，暗指了circRNAs无论如何参与自愈相关的脑部疾病。在蛋白复制领军与circRNAs生产量之在在依赖于排斥的负相关。因此，吸取无论如何是脑部之中高准确度circRNAs主要的理由。circRNAs另外一个耐人寻味适应性是其亚蛋白整合为。circRNAs主要整合为于蛋白疏松之中。而且，刊文看造出轴突之中circRNAs整合为在轴突，树突和微管锥体。耐人寻味的是，一些circRNAs表现造出成年期阶段特异的核-疏松转换整合为。最近的科学研究断实有了褐Hel25E和生命体UAP49/56作为circRNAs蛋白核输造出的不可或缺碱基，并且以依赖circRNAs窄度的作法作用。在绝大大部分意味着，circRNAs共有的唯一的构造就是马蹄形适应性，线粒锥体联接复合为物的依赖于，以及不依赖于帽长子形态和polyA尾巴。因此，识别和外输的前提必需不仅相对于特异于类似于circRNAs也必需识别一个或多个这些构造。circRNAs整合为到轴突，树突以及微管也是很耐人寻味的。由此可知不可信这种整合为是由于实有向交通运输还是致密后滞留。来得进一步的遗传基因和生化试验须要说明了动力circRNAs在轴突之高加索蛋白整合为的前提。近期，由此可知很难科学研究借助活蛋白图像实地调查circRNAs之中在在锥体和交通运输，而此类分析方法将会是检验这些理论的不可或缺。而且，这个科技领域即便如此缺乏对完全相同胞内区室之中circRNAs底物可有和适应性的精确描述。2.3 circRNA作为miRNA一般而言的可调长子一些窄非序列RNA可以通过选择性吸附（sponging）可调miRNA准确度和/或活性。科学研究声称某些circRNAs所含许多miRNA相结合为碱基，推测这些circRNAs也可以作为miRNA软锥体类动物。比如，CDR1as兼具73个seed-binding 碱基对miR-7，并且，AGO2 CLIP数据声称或许有许多miR-7相结合为到了这些碱基上。CDR1as敲除果蝇之中miR-7准确度开明但显着地下降，而miR-671缩减，暗指了这个circRNAs的依赖于有利于了miR-7，而使miR-671不有利于。因此，CDR1as无论如何在某些信号下可调了miR-7的存储和被囚。CDR1as也都能交通运输和被囚miR-7到类似于胞内隔室，可调miR-7一般而言。这个一般而言无论如何在将会被借助来交通运输基于miRNA的治疗。虽然对circRNAs核苷酸显然的监测以及AGO2 PAR-CLIP数据的分析分析方法揭示了绝大大部分circRNAs很难广泛相结合为到miRNA，即便如此有其他例长子如circSry，circHIPK，circFOXO3，circITCH，circBIRC6，它们都能与miRNA相结合为发挥作用一般而言性作用。借助AGO-RIP和CLIP关配锥体技术对监测是否依赖于circRNAs与miRNA在在必要震荡极度不可或缺。构建敲除和敲低蛋白系科学研究circRNAs与推实有的miRNA一般而言和准确度在在震荡也很不可或缺。2.4 circRNAs的之中文翻译2017年，几个课题组刊文了circRNAs可被之中文翻译。耐人寻味的是，可之中文翻译circRNAs趋向于采用与细胞内DNA同样的起始多肽链，而重新启动多肽链则是生命锥体开明的且特异于马蹄形ORF。该科学研究还注意到circRNAs是被腺锥体衍生物锥体的核糖锥体之中文翻译。另外的科学研究注意到起始多肽链干流的RRACH基序(R=G or A； H=A， C or U) 之中的A被选择性时，可以提高circRNAs的之中文翻译。由于circRNAs另有5’帽长子，它的之中文翻译是帽长子分立的。或许，某些之中文翻译circRNAs兼具在表面上核糖锥体进入碱基（IRES），都能在锥体内和锥体外以帽长子分立的作法之中文翻译。耐人寻味的是，绝大大部分circRNAs得造出的是与其细胞内DNA序列复合为物疏松的N内侧区域显然一致。这种缩稍短了的复合为物疏松无论如何会相互竞争者抑制作用其mRNA全窄对应物。专一性碱基Mef2无论如何就是一个例长子。考虑到这个科技领域的加速拓展，我们预计在接下来几年就能看到circRNAs之中文翻译以及造成了的生理效应的科学研究显现造出来。3. circRNAs 作为圈套、交通运输内置或脚手架由于circRNAs都能窄时在在依赖于以及相结合为RBPs，它们都能作为这些碱基的陷阱或者仓储长子。在某些意味着，circRNAs和细胞内DNA复合为物可必要或在在接地顺利完成震荡。circMbl看上去就是如此，它无论如何就隔断/仓储了MBL复合为物。这是也就是说的circMbl负反馈可调环路的一个小分长子。2016年，一项科学研究首次声称circANRILl可以作为一个复合为物脚手架。在NIH3T3果蝇成纤维蛋白，circFOXO3被注意到能分别与p21和CDK2震荡。circFOXO3-p21-CDK2三元复合为物的过渡到不利于了CDK2的一般而言，随后抑制作用了蛋白周期进程。3.1评量circRNAs的锥体内一般而言科学研究注意到，敲除CDR1as造成了了神经紊乱相关的行为学表现型。cia-cGAS (Cyclic GMP-AMP synthase) 不一实有高暗指于窄期培养HSC蛋白核之中，都能相结合为cGAS，不利于了它的转录。Cas9敲除cia-cGAS下游的桥头堡生殖蛋白之中反之亦然表征核苷酸抑制作用其暗指后，cia-cGAS有缺陷果蝇之中超音速HSC蛋白群锥体减小，并且升高了骨髓之中type I干扰素的产量，最终随之而来干蛋白耗竭。最新科学研究声称，采用遗传基因序列的shRNA针对反之亦然补拍联接敲低circMbl。当全身敲低circMbl时，随之而来DNA暗指忽略，雄性成年期致死，行为有缺陷，翅膀手部及飞行中的有缺陷。当敲低CNS之中的circMbl时，随之而来了不也就是说的微管一般而言。3.2 circRNAs的其他潜在一般而言circRNAs无论如何还有什么样的底物一般而言呢？circRNA兼具一个更让人着迷的构造即极其有利于并且随时在在吸取。因此，circRNAs可以作为蛋白专一性发展史的底物遗忘底物或者“飞行中记录内置”。从生理学论者来看，窄时在在依赖于的circRNA无论如何作为兼具复合为物序列潜能的存储库。可不成年期忽略或威吓，这些存储内置无论如何被之中文翻译为可调威吓积极响应或生理忽略的复合为物疏松。微管之中circRNA的本底之中文翻译无论如何是非常不可或缺的。因为circRNAs相结合为与RBPs，如miRNAs一样，circRNAs无论如何通过相结合为，呈递和被囚它们的船运到类似于胞内区室而发挥作用作用。这两项地考虑到circRNAs依赖于于囊冻，它们可以被交通运输到整个双腿，然后被类似于民在在组织接收，作为信号底物发挥作用作用。另外，一个circRNA可以承载1个或几个船运底物（miRNA，RBPs），因此可以作为药物交通运输被囚的载锥体。4.结论与将会本文近期里面现在的科学研究，声称circRNAs兼具多种一般而言，可以作为复合为物脚手架，征募其他适应性RNA，并且通过相结合为miRNAs冲击专一性沉默、之中文翻译和特异mRNA的水解；轴突之中circRNAs的不梯形地理分布暗指了必要蛋白在在交通运输的有无论如何；circRNAs都能序列从到复合为物，虽然现有察觉到绝大大部分无论如何的复合为物的生理一般而言，很有无论如何他们会与其细胞内DNA给实有RNA序列全窄复合为物构建某些能力也。由于RNA关配锥体技术的稳步拓展，我们预计接下来circRNAs科技领域将会有窄足的拓展。来得进一步的对circRNAs整合为，仓储，活蛋白内水解，基本的circRNAs震荡组，以及单蛋白图谱的理解都将在这个科技领域取得进步。原始造出处：Patop IL1, Wüst S1, Kadener S1.Past, present, and future of circRNAs.EMBO J. 2019 Aug 15;38(16):e100836. doi: 10.15252/embj.2018100836. Epub 2019 Jul 25.