J Clin Invest：揭示USP9X去泛素化ALDH1A3并保持稳定GCSs的间充质特性

粒状母细胞核瘤（GBM）是最常见于和威胁持续性的知觉恶持续性，其形态在于广泛的内异质持续性。尽管最近在多模式疗法特别获得了十分困难，但GBM病患者的结果依然令人沮丧。GBM拥有一个细胞核亚群，称为GBM细胞培养核（GSCs），较强自我修正活持续性和多向分立体化极致以及都是在能力也。因此，当务之急探索针对GSC的新疗法策略持续性。并且，醛脱氢酶（ALDH）激酶都有19种酶，它们将内源和外源醛代谢成相应的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，策划人体细胞核的各种生理过程。越来越多的证据确实，ALDH1A3在癌症细胞培养核（CSCs）里表现出高活持续性，并影响这些细胞核内的各种生物学形态。在GBM里，已辨认出ALDH1A3作为维持间充质（MES）GSC的自我修正和致瘤持续性的决定持续性分子。然而，MES GSCs里ALDH1A3失调的系统依然是神秘的。2019年4月8日，南京医科大学第一理学院王慧博团队等人在The Journal of Clinical Investigation上发表题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的短文，辨认出USP9X是一种真正的DUB，可调控ALDH1A3多NAD立体化和稳定立体化。并且，USP9X是预期ALDH1A3hi MES GSCs氟立体化物的决定持续性分子，是MES GSCs自我修正和致瘤持续性所必需的。同时还评估了USP9X抑制对病患者；也的MES GSC人族移植版模型的潜在治果。为了确定ALDH1A3蛋白质是否被NAD - 核酸系统（UPS）翻译后掌控，分析人员首先使用放线菌酮（CHX）切断蛋白质质从头合成并HEK293T细胞核和正常人星形粒状细胞核（NHAs）里的ALDH1A3蛋白质质水平。实际上，ALDH1A3在CHX处理的8小时内逐渐水解并几乎检测不到。此外，用核酸抑制剂MG-132处理细胞核引致ALDH1A3蛋白质水平不同寻常上升。这些数据确实ALDH1A3通过UPS水解。接下来，分析人员谋求认定负责ALDH1A3稳定立体化的潜在DUB，并使用靶向HEK293T细胞核里的98DUB的siGENOMERTF文库进行RNAi比对。该分析初始比对认定了与ALDH1A3表示相关的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293细胞核里的ALDH1A3共表示时，辨认出只有USP9X能够与诱发ALDH1A3必要交互作用，从而暗示USP9X是掌控ALDH1A3稳定持续性的不同寻常候选物。为了测试这一点，将Flag标记的WT USP9X或催立体化失活的突变体C1566A USP9X（在催立体化组蛋白质的一个决定持续性半乳糖里携带点突变）转染到HEK293T细胞核里。 WT USP9X而非C1566A突变体的表示以剂量选择持续性方式上升ALDH1A3蛋白质水平，确实USP9X以依赖于其DUB活持续性的方式调控ALDH1A3。粒状母细胞核瘤（GBM）细胞培养核（GSC）的间充质（MES）亚型推选癌细胞核亚群，其因其总体侵袭持续性和对常规疗法的免疫而闻名。最近已重申醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为维持GSC的MES形态的决定持续性密切相关。然而，支持者异常ALDH1A3表示的系统依然难以捉摸。在该分析里，分析人员辨认出NAD特异持续性蛋白质酶9X（USP9X）是MES GSC里ALDH1A3的真正去NAD立体化酶。 USP9X与ALDH1A3交互作用，解聚并稳定立体化。此外，分析得出FACS分选的USP9Xhi细胞核氟立体化物较强高ALDH1A3活持续性和有效致瘤能力也的MES GSC。USP9X的耗费不同寻常下调ALDH1A3，引致MES GSC的自我修正和致瘤能力也的丧失，这可以通过ALDH1A3的异位表示得到很大高度的挽救。此外，分析人员还确实USP9X抑制剂WP1130诱导ALDH1A3水解并且在MES GSC独有的原位人族移植版模型里揭示出不同寻常的疗法功效。另外，USP9X与原发持续性人GBM样品里的ALDH1A3表示尖锐相关，并且对于较强MES亚组的病患者较强肾功能实用持续性。总的来说，分析结果揭示了USP9X作为ALDH1A3蛋白质稳定立体化的决定持续性去NAD立体化酶和GSC定向疗法的潜在各种因素。零碎出处：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019